华中农业大学学报

作者：罗红，陈玉连，侯爱香，张鑫，朱洺志，常云龙，夏秀东，夏菠，肖愈

单位：1.湖南农业大学食品科学技术学院，长沙 410128;2.湖南省农业科学院棉花与蚕桑研究所，长沙 410125;3.宁波大学食品科学与工程学院，宁波 315211;4.湖南农业大学园艺学院茶学教育部重点实验室，长沙 410128;5.江苏省农业科学研究院农产品加工研究所，南京 210014

关键词：茯砖茶;冠突散囊菌;糖基转移酶;基因克隆;生物信息学分析;原核表达

基金：国家自然科学基金项目（32302611）；湖南省教育厅科学研究重点项目（24A0158）；芙蓉计划青年科技人才项目（2025RC3172）

为探究冠突散囊菌UDP-葡萄糖基转移酶EcUGT88E3在调控黄酮糖苷类物质合成中的作用，利用同源序列克隆EcUGT88E3基因，并进行生物信息学分析；构建了pET28a-EcUGT88E3/BL21（DE3）表达系统并优化诱导条件，实现EcUGT88E3基因的异源表达与分离纯化。结果显示：EcUGT88E3基因全长1 704 bp，其中5′-UTR为75 bp，3′-UTR为207 bp，完整开放阅读框为1 422 bp，编码473个氨基酸。生物信息学预测其编码的蛋白为疏水性蛋白，分子质量为52.03 ku。蛋白结构预测表明EcUGT88E3不具有信号肽和跨膜区特征，属于微粒体定位蛋白，含有GT1及GT-B超家族特征结构域。EcUGT88E3重组蛋白以包涵体形式表达，其原核表达载体在大肠杆菌BL21（DE3）中最佳诱导条件为27 ℃、0.2 mmol/L IPTG培养4 h。

来源：2025年第6期

《华中农业大学学报》期刊编辑部

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