国内刊号:42-1181/S
国际刊号:1000-2421
发布日期:
作者:余振,徐玉荣,吴哲宽,张静怡,张小宇,俸婷,程国军,李晓华,饶雄飞
单位:1.湖北省烟草科学研究院,武汉 430030;2.中南民族大学生命科学学院/ 微生物资源与利用湖北省工程技术研究中心,武汉 430074
关键词:α-淀粉酶;枯草芽孢杆菌SCUEC8菌株;ba8a基因;酶学特性
基金:中国烟草总公司“雪茄烟叶开发与应用重大专项”揭榜棒挂帅项目(中烟办2022[111]号,110202201039(XJ-10));国家自然科学基金项目(31070087,32372809); 湖北省大学生创新创业训练计划项目(SCX2024066)
为解决农作物秸秆降解的问题,采用选择性培养基从牛胃秸秆发酵物中筛选获得1株高产α-淀粉酶的菌株,命名为SCUEC8菌株。通过对SCUEC8菌株进行形态学观察和生理生化特性分析,根据16S rDNA 序列构建系统进化树,鉴定该菌为枯草芽孢杆菌。以SCUEC8菌株的总DNA为模板扩增α-淀粉酶基因ba8a,构建pET28a(+)-ba8a重组质粒,转化大肠杆菌BL21菌株进行异源表达,进一步研究Ba8a蛋白酶学特性。结果显示,ba8a基因大小为1 434 bp,Ba8a蛋白分子质量为52.9 ku ;在pH 5.0、反应温度 45 ℃条件下,Ba8a蛋白相对酶活性较高;Mn2+对Ba8a蛋白酶活性具有较高促进作用,Cu2+对Ba8a蛋白酶活性具有较高抑制作用;在pH 6.0、反应温度0 ℃条件下,Ba8a蛋白较稳定。结果表明,枯草芽孢杆菌SCUEC8菌株具有α-淀粉酶活性,有助于提高农作物秸秆的降解率。
来源:2025年第4期
《华中农业大学学报》期刊编辑部