华中农业大学学报

作者：马灵，袁轶，杨爽，高艺，陈学勋，焦立军，刘巍巍，薄文浩，庞晓明

单位：1.林木遗传育种全国重点实验室/林木育种与生态修复国家工程研究中心/北京林业大学生物科学与技术学院，北京 100083;2.内蒙古自治区赤峰市敖汉旗双井林场，赤峰 024300

关键词：根癌农杆菌;遗传转化;‘京枣39’;叶片;抗性筛选

基金：国家重点研发计划项目（2022YFD2200404）；国家自然科学基金项目（32271925）

为建立‘京枣39’高效遗传转化体系，以‘京枣39’叶片为外植体进行遗传转化，探究卡那霉素（kanamycin，Kan）质量浓度、头孢噻肟（cefotaxime， Cef）和特美汀（timentin， Tim）抑菌质量浓度、预培养时间、不同菌液浓度、侵染时间、乙酰丁香酮（acetosyringone， AS）浓度及共培养时间对‘京枣39’叶片转化率的影响。结果显示，‘京枣39’叶片最佳遗传转化条件为，5 mg/L Kan选择压，50 mg/L Cef、250 mg/L Tim抑菌质量浓度，预培养4 d，农杆菌菌液OD600 nm值为0.6，侵染时间20 min，共培养基添加200 μmol/L AS，共培养4 d。荧光检测和PCR试验证实外源目的基因已成功整合到‘京枣39’基因组中，实现了农杆菌介导的‘京枣39’叶片的遗传转化。

来源：2025年第1期

《华中农业大学学报》期刊编辑部

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