华中农业大学学报

作者：杜露平，鲁海燕，侯立婷，于晓明，程海卫，张元鹏，陈瑾，郑其升，侯继波

单位：1.江苏省农业科学院动物免疫工程研究所/国家兽用生物制品技术创新中心/ 江苏省食品质量安全重点实验室，南京 210014;2.兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心，泰州 225300

关键词：免疫增强剂CVC1302;体细胞高频突变;免疫机制;生发中心B细胞;胞苷脱氨酶;Pax5

基金：十四五重点研发专项（2022YFD1800800）；国家自然科学基金项目（32102690）；江苏省农业自主创新专项（CX（21）3135）

为探究CVC1302调控生发中心B细胞发生体细胞高频突变的免疫机制，本研究将4-羟基-3-硝基苯乙酰基耦联鸡卵白蛋白（NP-OVA）混合免疫增强剂CVC1302后，利用ISA206乳化获得疫苗。BALB/c小鼠分为2组，分别后腿肌肉注射NP-ISA206和NP-CVC1302-ISA206，每只50 μg NP-OVA，免疫后14 d，利用流式分选获得生发中心B细胞，利用巢氏PCR扩增B细胞免疫球蛋白序列可变区VH186.2，Western blot检测诱导活化的胞苷脱氨酶（AID）、Pax5表达水平，β-actin作为内参，比较组间AID、Pax5表达差异；利用荧光定量PCR检测AID、Pax5基因转录水平。试验结果显示：CVC1302显著诱导生发中心B细胞免疫球蛋白序列VH186.2突变频率，试验组W33L突变频率为62.2%，而对照组仅为20.25%；CVC1302可提升AID蛋白、Pax5蛋白表达水平，其中试验组AID蛋白相对表达水平为0.72，对照组仅为0.16，试验组Pax5蛋白相对表达水平为0.62，对照组仅为0.26；CVC1302增强AID基因、Pax5基因转录水平，相较于对照组分别提高2.36、4.13倍。推断CVC1302依赖Pax5介导AID表达，调控生发中心B细胞发生体细胞高频突变。

来源：2025年第1期

《华中农业大学学报》期刊编辑部

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