华中农业大学学报

北大核心,CA,JST,CSCD,WJCI

国内刊号:42-1181/S

国际刊号:1000-2421

华中农业大学学报杂志2024年第5期:莱茵衣藻LRR-1蛋白多克隆抗体的制备与鉴定

发布日期:

作者:冯雳,卢静,魏思雯,胡长峰,弋美霞,罗仕超

单位:1.江汉大学医学部,武汉 430056;2.江汉大学持久性有毒污染物环境与健康危害湖北省重点实验室, 武汉 430056;3.江汉大学生命科学学院,武汉 430056

关键词:莱茵衣藻;富亮氨酸重复序列;先天免疫;防御反应;多克隆抗体

基金:国家重点研发计划项目(2020YFA0907400);国家自然科学基金项目(32170702)

为深入研究富含亮氨酸重复序列(leucine-rich repeat,LRR)在机体先天免疫过程中的作用机制,以莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)为模式生物,通过生物信息学预测分析CrLRR-1蛋白的二级结构、亲水性及免疫原性等理化性质,人工设计并合成特异性肽段,与钥孔血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)偶联后免疫新西兰白兔。结果显示:采用间接ELISA法测定抗血清效价达到1∶512 000,将抗血清依次经Protein A和抗原亲和纯化后得到CrLRR-1蛋白多克隆抗体;利用免疫印迹与免疫荧光检测制备的抗体,该抗体可特异性识别莱茵衣藻内源LRR-1蛋白,且CrLRR-1蛋白主要定位于细胞膜。结果表明,成功制备CrLRR-1蛋白多克隆抗体。

来源:2024年第5期

《华中农业大学学报》期刊编辑部

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