华中农业大学学报

作者：李响，张小涵，李美琪，陈冉，冯颖，李林，桑晓宇，杨娜

单位：1.沈阳农业大学动物科学与医学学院/重要家畜疫病研究教育部重点实验室,沈阳 110866;2.辽宁成大生物股份有限公司,沈阳 110179

关键词：弓形虫;MIC1蛋白;杆状病毒系统;活性分析

基金：国家自然科学基金项目（31902297；31672546；32072891）；辽宁省教育厅项目（LJKZ0673；LSNQN202003）；沈阳市中青年科技创新人才支持计划项目（RC 210291）

为构建可溶性表达弓形虫MIC1蛋白质的重组杆状病毒株并分析重组蛋白质的活性，通过PCR扩增弓形虫mic1基因的编码序列并连接到pFastBac 1质粒中，将重组的转移质粒转化DH10Bac感受态细胞，通过蓝白斑筛选获得重组杆粒，转染Sf9细胞后连续培养3代获得重组杆状病毒株。结果显示，Sf9细胞在感染后的第3天出现典型的细胞病变；间接免疫荧光和Western blot试验结果表明MIC1重组蛋白质在感染的Sf9细胞中成功可溶性表达；纯化的MIC1重组蛋白质不仅具有结合唾液酸乳糖的能力，同时能够刺激Balb/c小鼠产生较高水平的特异性抗体（>1∶25 600）。以上结果表明，通过杆状病毒表达系统可获得具有生物学活性的弓形虫MIC1重组蛋白质。

来源：2024年第1期

《华中农业大学学报》期刊编辑部

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