华中农业大学学报

作者：刘宁宁，易萍，郭爱珍，胡长敏，陈颖钰

单位：1.华中农业大学动物医学院/农业微生物资源发掘与利用全国重点实验室,武汉 430070;2.湖北省兽医流行病学国际科技合作基地,武汉 430070;3.湖北洪山实验室, 武汉 430070

关键词：环介导等温扩增 （LAMP）;lktC基因;溶血性曼氏杆菌;可视化检测;综合防控

基金：湖北省重点研发计划项目（2020BBA055）；宁夏回族自治区重点研发计划项目（2021BEF02028）；国家现代农业（肉牛/牦牛）产业技术体系专项（CARS-37）

为建立一种能够快速、高效检测牛溶血性曼氏杆菌（Mannheimia haemolytica）的可视化LAMP检测法，利用LAMP引物设计软件，以溶血性曼氏杆菌保守基因lktC序列设计内引物、外引物及环引物，对其反应温度、Mg2+浓度、dNTPs浓度等条件进行优化，并检测了方法的敏感性、特异性及实用性。结果显示，该方法在68.2 ℃、6 mmol/L Mg2+、1.6 mmol/L dNTPs条件下达到最佳，40 min内完成检测并可通过肉眼判定结果，对细菌的最低检测限为6.7×10-1 cfu/μL，对lktC重组质粒的最低检测限为7.9×102 copies/μL，敏感性高；与15种病原均不发生交叉反应，特异性好；对背景清晰小鼠肺组织样本检测结果显示该方法实用性良好，且优于普通PCR方法。表明该方法可快速、高效检测牛溶血性曼氏杆菌。

来源：2023年第2期

《华中农业大学学报》期刊编辑部

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