华中农业大学学报

作者：陈传玉，谭樊杰，殷平，张德林

单位：作物遗传改良全国重点实验室/湖北洪山实验室/华中农业大学生命科学技术学院，武汉 430070

关键词：（pp）pGpp;合成生物学;体外合成;RelA;GppA;YvcI

基金：国家自然科学基金面上项目（31770878）

针对目前信使分子（pp）pGpp提取和合成成本高、时间长、技术难的问题，以现有的体外酶合成（pp）pGpp的方法为基础，建立和优化了新的体外合成技术。结果显示，通过（pp）pGpp合成酶RelA、GppA和YvcI在25 mmol/L Tris-HCl（pH 9.0）、15 mmol/L MgCl2、100 mmol/L NaCl条件下于37 ℃反应30 min，经阴离子交换进一步纯化，即可获得高纯度（pp）pGpp分子。此方法与传统的细菌或植物体内直接提取、现有的体外酶法制备流程相比，具有操作简单、快速、成本低、环境友好等优势，能够满足下游生化分析和结构生物学实验需求，为微生物信号通路及开发新的抗菌药物研究提供物质基础。

来源：2022年第4期

《华中农业大学学报》期刊编辑部

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