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国内刊号：42-1181/S
国际刊号：1000-2421
发布日期:
作者：王金玉，上官爱哨，孙玉梅，蒋金河，刘忠柱，张淑君
为了明确IL20RB、ATP6V0A1和STX10基因对猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）和猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus，PEDV）的增殖作用，利用CRISPR/Cas9技术在PK15-CD163-Cas9细胞和IPEC-J2-Cas9细胞（笔者所在实验室前期制备）中分别敲除这3个基因，用PRRSV感染基因敲除的3种细胞（PK15-CD163-Cas9-ATP6V0A1、PK15-CD163-Cas9-IL20RB和PK15-CD163-Cas9-STX10），荧光定量PCR检测PRRSV的ORF7基因表达水平，分析PRRSV增殖情况；用PEDV感染基因敲除的3种细胞（IPEC-J2-Cas9-ATP6V0A1、IPEC-J2-Cas9-IL20RB和IPEC-J2-Cas9-STX10），荧光定量PCR检测PEDV的N蛋白基因表达水平，分析PEDV增殖情况。结果显示，在3个基因分别被敲除的PK15-CD163-Cas9-ATP6V0A1、PK15-CD163-Cas9-IL20RB和PK15-CD163-Cas9-STX10细胞中病毒基因ORF7表达水平均显著低于未敲除基因的细胞（PK15-CD163-Cas9-NC，对照组），在3个基因分别被敲除的IPEC-J2-Cas9-ATP6V0A1、IPEC-J2-Cas9-IL20RB和IPEC-J2-Cas9-STX10细胞中PEDV的N蛋白基因表达水平均显著低于未敲除基因的细胞（IPEC-J2-Cas9-NC，对照组），表明敲除这3个基因对PRRSV和PEDV增殖均具有显著的抑制作用，ATP6V0A1、IL20RB和STX10对PRRSV和PEDV增殖均具有重要调控作用。
来源：2022年第2期
《华中农业大学学报》期刊编辑部
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