华中农业大学学报

作者：丁一峰，聂若男，朱文娟，王吉，王佳，王小红

关键词：鼠伤寒沙门菌; 基因组分析; 噬菌体裂解酶; 表达纯化; 裂解活性; 食源性致病菌; 抗菌药物替代品

基金：“十三五”国家重点研发计划重点专项(2017YFC1600100)；国家自然科学基金面上项目（31772054）

为开发噬菌体裂解酶作为一种新型的抗菌剂，用于沙门菌的防控，采用生物信息学及异源表达蛋白的方法，获得鼠伤寒沙门菌噬菌体T139的裂解酶，并验证裂解酶对鼠伤寒沙门菌的裂解活性。通过对鼠伤寒沙门菌噬菌体T139基因组进行分析，发现该基因组全长38 854 bp，平均GC含量为49.10%，不包含tRNA基因。进化树分析表明噬菌体T139属于T7噬菌体属，共预测出43个ORFs，有23个被赋予已知功能。多序列比对及保守结构域分析表明，orf 40基因编码的蛋白（LysT40）包含126个氨基酸残基，具有内肽酶保守结构域，为可能的噬菌体裂解酶。LysT40二级结构中存在大量的螺旋结构（70.63%），使得该蛋白能够保持结构稳定。将orf 40进行异源表达、纯化，经过SDS-PAGE和Western blot分析，在10~15 ku处获得单一目标蛋白条带，纯化的蛋白质量浓度为280 μg/mL。LysT40在30 min内对氯仿或EDTA预处理的鼠伤寒沙门菌具有较好的裂解活性，吸光值OD600相比于对照组分别下降0.18和0.31。

来源：2021年第6期

《华中农业大学学报》期刊编辑部

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