华中农业大学学报

作者：段镇淳，张昭阳，林拥军

关键词：水稻;生长素通路; 愈伤诱导; OsIAA10;CRL1;酵母双杂交;基因敲除;根发育;超表达突变体

基金：国家重大专项“抗虫转基因水稻新品种培育”（2016ZX08001001）

构建水稻LBD基因家族中CRL1基因的CRISPR/CAS9基因敲除载体，并转化中花11水稻愈伤，获得了8个转基因片段缺失家系；对CRL1基因敲除材料种子进行愈伤诱导实验；结果显示，它们的愈伤组织诱导受到了强烈抑制，与已知的水稻OsIAA10基因的RNA干扰材料表型相似。进行OsIAA10的亚细胞定位实验，结果显示，OsIAA10同时定位在细胞核与细胞膜上。通过酵母双杂交筛库实验，发现OsIAA10能与OsARF家族成员中的OsARF5、OsARF1、OsARF721、OsARF23四个转录因子发生互作。以CRL1基因启动子为诱饵构建载体，进行酵母单杂交点对点实验，结果显示，这4个转录因子中只有OsARF5与OsARF21能特异性结合CRL1基因启动子区的AuxRE基序，激活CRL1基因转录。本研究结果初步证明水稻侧根发育通路与愈伤组织诱导过程存在直接相关，水稻与双子叶植物之间存在保守的生长素调控机制，在水稻种子的愈伤组织诱导过程中发挥着重要的作用。

来源：2021年第3期

《华中农业大学学报》期刊编辑部

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