华中农业大学学报

作者：王一菲，刘新星，张青，郑育声，李东栋

关键词：油棕; 试管苗; 同源表达; 原生质体; 瞬时转化; 功能验证; 植株再生; 亚细胞定位; 蛋白质互作

基金：国家自然科学基金项目(31660222);海南省自然科学基金创新团队项目(2019CXTD397)

以油棕试管苗幼嫩叶片(发芽后25 d)为材料，建立油棕叶肉原生质体分离及瞬时转化体系。取幼嫩油棕叶片在30 g/L纤维素酶和8 g/L离析酶的作用下，酶解3.5 h后，2 000 r/min、4℃离心5 min得到油棕叶肉原生质体。借助绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白双质粒瞬时共转化，对油棕叶肉原生质体瞬时体系的相关参数进行优化,结果显示：当瞬时转化过程中质粒含量比为8∶1，PEG/Mg2+溶液中PEG4000的质量浓度为200 g/L、Mg2+溶液质量浓度为100 g/L，热激20 min，再经过20 min室温孵育，最后加入的洗液体积为2 mL时，原生质体的转化效率最高。

来源：2021年第1期

《华中农业大学学报》期刊编辑部

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