华中农业大学学报

作者：张莹莹，李志，张璐璐，李晓，范刚，彭芷芊，任婧楠，潘思轶

关键词：指状青霉; 柠檬烯; 提取条件; 生物转化; 柠檬烯转化酶; 响应面优化; 酶活性

基金：国家自然科学基金项目（31671824）；国家重点研发计划专项（2017YFD0400101）

以指状青霉(Penicillium digitatum) DSM62840为研究对象，采用高压细胞破碎法破碎菌体，对其转化柠檬烯生成α-松油醇过程中的相关酶的提取条件进行优化。以柠檬烯转化酶活性为指标，在单因素试验的基础上结合响应面试验法，确定最佳提取条件；同时，对柠檬烯转化酶的酶学性质进行了初步探索。结果显示，最佳提取条件为：破碎压力100 MPa、破碎6次、液料比15∶1 (mL/g)，在此条件下，α-松油醇的质量浓度为855.75 mg/L，酶活力达到71.31 U。柠檬烯转化酶最佳转化时间为4 h，在磷酸盐缓冲液中获得的酶活性最高；该酶可能为细胞色素P450，且不同的金属离子对酶活性的影响不同：Fe2+对酶有轻微的抑制作用，而Ca2+、Mg2+、Mn2+、Zn2+、Co2+、Ba2+、Na+、K+、Fe3+、Ni2+则对酶有不同程度的激活作用。粗酶液SDS-PAGE电泳结果表明优化后的提取工艺效果较好。

来源：2020年第4期

《华中农业大学学报》期刊编辑部

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