华中农业大学学报

作者：魏燕鸣

关键词：禽腺病毒; 鸡肝癌细胞; 包涵体; 心包积水; 病毒传代; 细胞感染模型; 灭活疫苗; 弱毒活疫苗

基金：国家重点研发计划项目（2016YFD0501600）

为建立禽腺病毒4型的禽源细胞感染模型，并考察细胞培养毒株对动物的致病性，将实验室2014-2017年间分离的5株血清4型禽腺病毒接种鸡肝癌细胞(leghorn male hepatocellular cells,LMH）并盲传，选取各病毒的LMH细胞培养物，按一定剂量经腿部肌肉注射接种4周龄SPF鸡；记录试验动物的发病情况，剖检采集发病或死亡鸡的脏器并制作病理切片，观察并分析病毒细胞培养物感染SPF鸡的组织病理变化。结果发现：5株血清4型禽腺病毒在LMH细胞上盲传至第4代时开始出现I群禽腺病毒所致的特异性细胞病变，提取培养物中病毒核酸并进行PCR鉴定，均能扩增出大小约564 bp的特异性扩增片段，表明病毒能在LMH细胞上稳定增殖。选取各病毒第10代细胞培养物进行SPF鸡回归试验，发现细胞培养上清接种4周龄SPF鸡后第3天开始，有部分鸡开始精神沉郁，食欲消退、卧地不起瘫痪并迅速死亡，病理剖检及病理组织切片结果显示HB1、HB2、HB3和SD1毒株保持对4周龄SPF鸡的致病性，病死鸡中能观察到典型的组织病理学变化，而对照组不出现任何临床症状及病理变化。以上结果表明，LMH细胞可用于禽腺病毒增殖传代，是开展禽腺病毒分子致病机制研究的理想细胞模型。

来源：2020年第2期

《华中农业大学学报》期刊编辑部

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