华中农业大学学报

作者：张晴

关键词：Astragalus sinicus;  Mesorhizobium huakuii; nodulation; phosphate transporter; Pht1 family

基金：国家自然科学基金项目（31670240）

为了阐明豆科植物共生反应与免疫反应的协调机制，揭示参与植物细胞侵染、定殖及固氮过程中根瘤菌基因的功能，以苜蓿中华根瘤菌Sm2011为材料，构建了约8 000株Tn5sacB转座子插入的突变体库。利用巢式PCR检测技术，从中鉴定和筛选出nodC、nifH、smc01188和smc04024等4个特定目标基因的插入突变体及其插入位点。通过结瘤试验考察突变体共生及固氮表型，结果显示：植株接种smc01188突变体28 d后，与对照植株相比，该基因突变导致根瘤固氮酶活下降，与慢生型大豆根瘤菌该基因突变体的表型类似; smc04024基因突变不影响植株生长，根瘤发育基本正常；接种nifH突变体后，植株呈缺氮表型，生长发育受阻，根瘤为白色；接种nodC突变体后植株不结瘤，说明Tn5SacB的插入导致nifH、nodC基因功能丧失。利用PCR检测、鉴定和分离目标基因突变体是一种行之有效的方法。

来源：2019年第1期

《华中农业大学学报》期刊编辑部

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